2018年11月9日／河南大学淮河医院／Cellular Physiology and Biochemistry
由河南大学淮河医院表在2018年11月《Cellular Physiology and Biochemistry》（细胞生物学与生物化学）的研究报告证实，灵芝酸A有助减缓缺氧导致的大鼠心肌细胞损伤。
从灵芝三萜分离出的灵芝酸A（ganoderic acid A，简称GAA）早已被证实具有多种疗效，例如能抑制肿瘤生成、抑制HIV活性或保护肝脏等，然而关於灵芝酸A能否保护缺氧所致的心肌细胞损伤，科学上仍尚未有清楚了解。
冠状动脉疾病包含稳定型心绞痛、非稳定型心绞痛、心肌梗塞与突发性心脏休克。虽然目前医疗在诊断治疗冠状动脉疾病比起十年前已进步许多，但全球还是有相当多人死於此类疾病。其中，心肌梗塞（也称心肌梗死）最主要是由於心脏缺血、缺氧导致心肌细胞坏死所造成。也就是说，心肌细胞长期缺氧累积的伤害，会诱导心肌细胞的凋亡，进而引发心肌梗塞。
目前已知心肌细胞中的微小核醣核酸-182-5p（miR-182-5p）会保护大鼠不因心肌缺氧而导致心肌细胞坏死，因此本研究除了探讨灵芝酸A对於大鼠心肌细胞在缺氧状态下的保护作用，也进一步分析其作用机制是否与微小核醣核酸-182-5p有关。
灵芝酸A减轻缺氧对大鼠心肌细胞造成的损伤
实验显示，在缺氧环境下把大鼠心肌细胞H9c2与不同浓度的灵芝酸A一起培养12小时後，随着灵芝酸A浓度的提高，细胞存活率会跟着上升（图1A），细胞中活化生长的因子表现量也比缺氧情况下的细胞来得高（图1B）；走向凋亡的细胞数量也会跟着下降（图1C），诱导细胞凋亡的相关因子也会因为灵芝酸A的作用而降低（图1D）。
此结果说明了，灵芝酸A能减轻心肌细胞在缺氧状态下的损伤程度，并且抑制心肌细胞凋亡。
图1 灵芝酸A（GAA）对大鼠心肌细胞在缺氧环境下具有保护作用。
灵芝酸A调控miR-182-5p，保护心肌细胞
前面提过，心肌细胞内的微小核醣核酸-182-5p（miR-182-5p）可保护大鼠心肌不因缺氧而坏死，而根据研究者的实验显示，大鼠心肌细胞内的miR-182-5p表现量会在有灵芝酸A的条件下明显提升（图2）。
但如果事先以「miR-182-5p抑制剂」让大鼠心肌细胞内的miR-182-5p无法表现，再加入灵芝酸A，则灵芝酸A的添加既无法提高心肌细胞在缺氧环境下的存活率（图3B），亦无法提高活化细胞增生因子的表现量（图3C），细胞凋亡的比例（图3D）与相关细胞凋亡诱导因子的表现量（图3E）也与没有添加灵芝酸的控制组（缺氧受损的大鼠心肌细胞）没有差异。
这些结果说明了，灵芝酸A确实是能透过活化miR-182-5p的表现，来降低缺氧对细胞所造成的伤害。
图2 灵芝酸A（GAA）对大鼠心肌细胞内miR-182-5p的调节作用。
图3 当miR-182-5p受到抑制时，灵芝酸A（GAA）会对大鼠心肌细胞失去保护作用。
灵芝酸A→上调miR-182-5p→抑制PTEN表现→活化PI3K/AKT路径（→抑制心肌细胞凋亡）
由於过去已有其他研究指出，抑制心肌细胞内的PTEN蛋白（phosphatase and tensin homolog，磷酸酯酶与张力蛋白同源物）的表现，也可促进心肌细胞的存活，因此本研究的研究者又进一步探讨了灵芝酸上调miR-182-5p之後，对於PTEN蛋白，以及受PTEN影响的PI3K/AKT讯息传递路径会发生什麽变化。（编按：PI3K/AKT讯息传递路径可调控细胞增生与凋亡）
实验结果显示，miR-182-5p的有无，确实会影响PTEN的表现──当miR-182-5p受到抑制时PTEN的基因和蛋白表现量会上升，但在miR-182-5p有表现的情况下，PTEN的基因和蛋白表现量则会明显下降（图4A和B）。
实验也发现，在缺氧环境下的大鼠心肌细胞中加入灵芝酸A之後，大鼠心肌细胞中的PTEN蛋白表现量会下降，PI3K和AKT蛋白表现量则会增加（图4C）。（编按：当PI3K/AKT被活化时，会对细胞凋亡发挥抑制作用。）
图4 miR-182-5p对PTEN基因表现（图A）和蛋白表现量（图B）的影响，以及灵芝酸A（GAA）对大鼠心肌细胞PTEN、PI3K、AKT蛋白的调控作用（图C）。
灵芝酸A保护心肌细胞的作用，能应用在心肌梗塞的治疗？
综合上述实验结果可知，灵芝酸A会透过增加微小核醣核酸miR-182-5p与降低PTEN的表现，来活化P13K/AKT讯息传递路径。此作用机制，应是灵芝酸A之所以能在缺氧的环境下维持心肌细胞的存活、抑制心肌细胞的凋亡的原因之一。
此研究成果有助於我们进了解灵芝酸A对於心肌梗塞的保护作用，也为灵芝酸A治疗心肌梗塞的临床应用提供了理论基础，值得进一步探究。
〔资料来源〕Zhang X, et al. Ganoderic Acid A Protects Rat H9c2 Cardiomyocytes from Hypoxia-Induced Injury via Up-Regulating miR-182-5p. Cell Physiol Biochem. 2018;50(6):2086-2096. doi: 10.1159/000495053. Epub 2018 Nov 9.
